透射电镜制样要用高压冷冻（透射电镜制样）

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1、透射电镜生物样品制备步骤生物样品, 透射电镜, 制备步骤 一．取材：组织块小于1立方毫米二．固定： 5%戊二醛，磷酸缓冲液配制固定2小时或更长时间。

2、用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次1%锇酸固定液固定 2-3小时用0.1M磷酸漂洗液漂洗 15分 三次三．脱水： 50%乙醇 15-20分70%乙醇 15-20分90%乙醇 15-20分90%乙醇 90%丙酮（1：1） 15-20分90%丙酮 15-20分以上在4度冰箱内进行100%丙酮 室温 15-20分三次四．包埋： 纯丙酮+包埋液（2：1）室温 3-4小时纯丙酮+包埋液（1：2）室温 过夜纯包埋液 37度 2-3小时五．固化： 37度烘箱内 过夜45度烘箱内 12小时60度烘箱内 24小时六．超薄切片机切片 50-60 nm七．3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色八．透射电镜观察。

3、拍片 由于生物样品含水太多，在电镜中会被真空蒸发掉从而破坏了结构，所以需要一些能够把水温和取代掉、并且自身没有结构的物质，这就是树脂包埋剂。

4、正因为生物脆弱、结构容易破坏，所以才需要温和的制样方法，方法才这么复杂。

5、生物电镜制样就是最主要的工作，看电镜倒是次要的。

6、以下是生物样品超薄切片的流程图：。

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